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T4 DNA连接酶

型号：		9015-85-4
所属分类：		酶和辅酶
品牌：		进口分装
促销价：	￥600.00	市场价:	￥600.00

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"[CAS号]9015-85-4 [规格]BR [包装]1KU [到货期]2-3天"

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T4 DNA连接酶- 详细介绍：

英文名称：T4DNALigase

CAS号：9015-85-4

分子量：55.3kDa，单体

级别：BR

来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌

活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol[32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mMTris-HCL(PH7.5),10mMDTT,10mMMgCL2,1mMATP,25ug/mlBSA,12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的LambdaDNA产物所需的酶量）

抑制剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200mM时，可强烈抑制T4DNALigase活性

失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟

注意：T4DNALigase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNALoadingDye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用氯仿抽提方法除去连接混合物中的T4DNALigase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物

质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力

性状(以下信息仅供参考)：液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP

用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性

保存：-20°C

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